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inspiralis DNA Unwinding Assay Kit

更新時(shí)間:2019-07-05      點(diǎn)擊次數(shù):1588

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產(chǎn)品描述(產(chǎn)品編號(hào):Duksr001、Dukr002、Duks003)在稀釋緩沖液中以2 U/L的低濃度供應(yīng)酶。儲(chǔ)存于-80C(穩(wěn)定3個(gè)月,未稀釋?zhuān)?。建議對(duì)酶進(jìn)行校準(zhǔn),以避免重復(fù)的凍融循環(huán)。對(duì)于體外實(shí)驗(yàn)室搜索僅使用。

展開(kāi)分析典型反應(yīng)包括15μL(2X)分析緩沖液、0.5μL PBR322(1μg/μL)加上小麥胚芽拓?fù)銲(2.5 U)和化合物(視情況而定),總體積為30μL。反應(yīng)在37℃下培養(yǎng)30分鐘。加入20μl水和50μl丁醇,反應(yīng)短暫旋轉(zhuǎn),離心分離。萃取后,將水層(下層)與等體積的STEB混合,用氯方/異戊醇萃取,并對(duì)瓊脂糖凝膠進(jìn)行分析,凝膠可在氯喹(CQ)存在或不存在下運(yùn)行。超冷法測(cè)定BR322。TOPO I單獨(dú)使質(zhì)粒松弛(通道3),但在TOPO I和ETBR的存在下,質(zhì)粒運(yùn)行接近過(guò)篩DNA(通道4)。

 

質(zhì)量控制
核酸內(nèi)切酶分析:用1μg的小麥胚芽拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ在6℃下孵育0.5 g,在瓊脂糖凝膠電泳中檢測(cè)到松弛DNA為開(kāi)放的圓形或線性形式。

 

 

 

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